細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑盒（MTT法）

細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑盒（MTT法）

產(chǎn)品編號	包裝	價格
130005-M	300T	185.00
130005-M1	500T	328.00
130005-M2	1000T	572.00

產(chǎn)品簡介
　　噻唑蘭（Methylthiazoletetrazolium, MTT）是一種可接受氫離子的淡黃色唑氮鹽染料，被活細(xì)胞線粒體呼吸鏈中的琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C還原，使tetrazolium環(huán)開裂，生成水不溶的深紫色結(jié)晶產(chǎn)物甲簪（formazan）。死細(xì)胞因喪失琥珀酸脫氫酶活性，因此甲簪的生成量僅與活細(xì)胞數(shù)目成正比。在特定溶劑存在的情況下，甲簪可以被*溶解，借助酶標(biāo)儀測定570nm波長附近的吸光度，可推算出活細(xì)胞的數(shù)量或細(xì)胞存活率。細(xì)胞增殖速度越快，則甲簪生成的量越多，吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則甲簪生成的量越少，吸光度越低。由于操作簡便，成本低，不污染環(huán)境，克服了傳統(tǒng)的同位素?fù)饺牖蜥尫艑?shí)驗(yàn)等操作復(fù)雜，成本高，對儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室條件要求高，難于防護(hù)等因素，而被廣泛地用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。
    賽馳生物開發(fā)生產(chǎn)的細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑盒（Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit） 以MTT為指示劑，在經(jīng)典操作方法的基礎(chǔ)上，采用了*的甲簪溶解液，可以直接溶解甲簪，而無需離心去除原有的培養(yǎng)液，故可避免因甲簪部分被吸除而引起的操作誤差，具有本底低，靈敏度高，線性范圍寬，操作簡便等特點(diǎn)。 
包裝清單      

保存條件 
    MTT溶液-20℃保存，一年有效；Formazan溶解液室溫或-20℃保存。 
使用說明 
    1. 細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)，一般可在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行。
    2. 每孔加入100微升細(xì)胞懸液。細(xì)胞的數(shù)量取決于實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)時間。增殖實(shí)驗(yàn)每孔通常加入10³個以上數(shù)量的細(xì)胞；細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔至少加入5x10³個或以上數(shù)量的細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等因素確定）。
    3. 接種的細(xì)胞按照實(shí)驗(yàn)需要，送入細(xì)胞培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。增殖實(shí)驗(yàn)通常要給予0-10微升特定的藥物或生長因子進(jìn)行刺激。細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)通常要給予0-10微升抑制因子或細(xì)胞毒藥物；
    4．培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入20微升MTT溶液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育3－6小時；  
    5．孵育結(jié)束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育，直至在鏡下觀察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時左右，紫色結(jié)晶會全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解的時間會短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多，溶解的時間會略長。 
    6. 在570nm測定吸光度。如無570nm濾光片， 560-600nm范圍的濾光片均可使用。